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色谱柱类型 颗粒尺寸 压力限制
Poroshell 120 1.9 µm
2.7 μm, 4 μm
1300 bar (19,500 psi)
600 bar (9000 psi)
Poroshell 300 5 μm 400 bar (6000 psi)
ZORBAX 快速分离 3.5 µm 400 bar (6000 psi)
ZORBAX 快速分离高通量 (RRHT) 1.8 μm 600 bar (9000 psi)
ZORBAX 快速分离高分辨率
(RRHD)
1.8 μm 1200 bar (17,000 psi)
所有 ZORBAX, Pursuit,
和 Polaris, 色谱柱,未记录为
RRHT 或 RRHD,以及 HC-C18(2),
TC-C18(2)
3.0 μm, 3.5 μm,
5 μm
400 bar (6000 psi)
最大操作压力 — 内径最大为 9.4 毫米的色谱柱
建议的梯度初始比例
流动相选择和操作温度
键合固定相本质上是非极性的,最适合与极性流动相结合使用,
如甲醇/水或乙腈/水混合物。增加有机相比例通常会缩短样品
的保留时间。
固定相 用法说明
大多数反相色谱柱 最初为 5% 甲醇或乙腈,100% 甲醇或
乙腈作为最终溶剂。
ZORBAX Eclipse PAH* 最初为 30 或 40% 乙腈,至 100% 乙腈作为最
终溶剂。要提高分离度,可能需要将色谱柱冷却
至 15 至 20 °C。
ZORBAX Bonus-RP 与传统的长链烷基固定相相比,化合物洗脱需要
使用浓度较低的有机流动相改性剂。
大分子色谱柱
(如 Poroshell 300,
ZORBAX 300SB色谱柱)
多肽、蛋白质、DNA 片断等的分离通常使用三
氟醋酸或甲酸改性剂以进行 pH 控制和/或
作为离子对添加剂,以获得所需的保留和选择
性。有机缓冲液(如 TRIS)对于中间 pH 应用特
别有帮助。
*在温度 < 40 °C 时色谱柱达到最佳使用寿命。