Выбор подвижной фазы и рабочих температур
Привитая неподвижная фаза по своей природе является неполярной и
чаще всего используется с полярными подвижными фазами, такими как
смеси метанола с водой или ацетонитрила с водой. Увеличение доли
органического компонента уменьшает время удерживания образцов.
Длительная работа при максимальной температуре сокращает срок
службы колонки.
Использование элюентов на основе чистой воды с колонками PLRP-S
значительно сокращает срок службы колонки и может привести к
быстрому размыванию пиков по ширине и асимметрии.
Рекомендованные начальные градиенты
При разделении биологических молекул для улучшения элюции из
колонки обычно используются градиентные условия— увеличение
количества органической составляющей. Разделение пептидов, поли-
пептидов и белков чаще производится с помощью кислых элюентов с
использованием трифторуксусной кислоты (TFA) или муравьиной кислоты
(FA) в качестве модификатора для изменения pH и (или) в качестве
ионогенной добавки для получения требуемой степени удерживания и
селективности. Для элюирования используются органические
растворители, такие как ацетонитрил (чаще всего), метанол и этанол.
С дополнительными сведениями о разделении пептидов можно ознако миться
в части 11 (стр. 497–508) книги Introduction to Modern Liquid Chromoto graphy,
Second Edition. L.R. Snyder, J. J. Kirkland (John Wiley & Sons, 1979).
РУССКИЙ
To Next Page
Loading...
Need help?
General
