utilizado otros estándares para efectuar mediciones de densidad, incluyendo suspensiones de
dióxido de titanio
2
y de partículas de látex
3
.El nefelómetro PhoenixSpec usa suspensiones de
partículas de látex como patrones de calibración que no es necesario agitar antes de usar.
La medición instrumental de la turbidez se basa en la capacidad de las partículas de dispersar la
luz cuando están en suspensión. La medición de esta luz dispersada se llama nefelometría
4
. Para
obtener una medición exacta de la densidad hay que utilizar un método fiable de calibración.
PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO
El nefelómetro PhoenixSpec es un instrumento de estado sólido que utiliza una bombilla de
filamento de tungsteno como fuente de luz, un detector de 90º para observar la luz dispersada
y un detector de luz transmitida. El microprocesador del instrumento calcula la proporción de las
señales para los detectores de 90º y de luz transmitida. La técnica radiométrica compensa los
materiales absorbentes del color y/o de la luz y las fluctuaciones de la intensidad de la bombilla.
Antes de realizar mediciones, el instrumento PhoenixSpec se calibra con el Kit Calibrador
PhoenixSpec o PhoenixSpec AP. Para determinar el equivalente de McFarland de una suspensión
microbiana se coloca un tubo en la cámara de lectura y se pulsa el botón de análisis. Los
resultados aparecen en la pantalla de cristal líquido (LCD) en unidades de McFarland. A diario se
leen como muestra los calibradores de 0,25 y 0,5 en el Kit Calibrador PhoenixSpec para
garantizar un funcionamiento correcto. A diario se leen como muestra los calibradores de 0,25,
0,5 y 2,0 en el Kit Calibrador PhoenixSpec AP para garantizar un funcionamiento correcto.
ESPECIFICACIONES
Advertencias y precauciones
Para uso diagnóstico in vitro.
1. El nefelómetro BD PhoenixSpec está diseñado para funcionar solamente con tubos “L” de BD
(16 x 75 mm). El volumen mínimo de llenado aceptable son 2,0 mL.
2. El nefelómetro BD PhoenixSpec está diseñado para su uso solamente con los sistemas BD
Phoenix y BBL Crystal.
PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados: Nefelómetro BD PhoenixSpec, adaptador de CA, Kit Calibrador
PhoenixSpec (0,25, 0,5, 1,0 y 4,0 unidades de McFarland), Kit Calibrador PhoenixSpec AP (0,25,
0,5, 1,0, 2,0 y 4,0 unidades de McFarland) y cuatro pilas alcalinas AA (no recargables).
Materiales necesarios pero no suministrados: Medios auxiliares de cultivo y equipo necesario
para preparar una suspensión bacteriana.
Instrucciones:
INSTALACIÓN Y SUSTITUCIÓN DE LAS PILAS: Sacar el instrumento y las pilas de la caja de
embalaje. Quitar la tapa del compartimiento de las pilas del fondo del instrumento e instalar las
pilas. La polaridad correcta de las pilas se indica en su soporte. Volver a instalar la tapa del
compartimiento de las pilas.
UTILIZACIÓN DEL ADAPTADOR DE CA: Enchufar la clavija del adaptador en el conector del
instrumento. El adaptador de CA se puede utilizar con o sin las pilas instaladas. El adaptador de
CA no recargará las pilas instaladas.
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN –
Notas:
• El instrumento se debe calibrar cada tres meses, cuando la verificación de calibración diaria de
los calibradores PhoenixSpec de 0,25, 0,5 y/o 2,0 tengan una lectura fuera del rango de
McFarland de 0,23 – 0,27, 0,45 – 0,55 y 1,8 – 2,2, respectivamente, o si lo ordena la política o la
experiencia del laboratorio.
• Utilizar sólo el Kit Calibrador PhoenixSpec o PhoenixSpec AP suministrado para uso con el
instrumento PhoenixSpec.
• Conservar los calibradores PhoenixSpec en el embalaje suministrado para evitar arañar los
tubos, como podría ocurrir en una gradilla portatubos metálica, por ejemplo. Los arañazos o la
suciedad en la superficie de los tubos pueden afectar a las lecturas.
• No utilizar los calibradores PhoenixSpec después de su fecha de caducidad, que figura en la etiqueta.
• El instrumento debe colocarse en una superficie horizontal estacionaria.
• Si aparece un código de error parpadeando en la pantalla de LCD durante el procedimiento,
véase la sección de RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS.
• No es necesario agitar los calibradores PhoenixSpec antes de usarlos.
1. Pulsar el botón de encendido para encender el instrumento.
2. Insertar el calibrador PhoenixSpec de 0,25 en la cámara de lectura. Pulsar el botón de
calibración.
3. La pantalla mostrará parpadeando S1 (Standard 1).
4. Pulsar el botón de lectura. La pantalla hará una cuenta atrás a partir de 10.
5. La pantalla mostrará parpadeando S2. Quitar el calibrador de 0,25 e insertar el calibrador de
1,0. Pulsar el botón de lectura.
6. La pantalla hará una cuenta atrás a partir de 10, después mostrará intermitentemente S3.
Quitar el calibrador de 1,0, insertar el calibrador de 4,0 y pulsar el botón de lectura.
7. La pantalla hará una cuenta atrás a partir de 10, después volverá a S1. Pulsar el botón de
calibración.
8. Quitar el calibrador de 4,0. La calibración está ahora completa.
Nota: Si se producen errores, véase la sección de RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS.
PROCEDIMIENTOS DE ANÁLISIS –
Notas:
• El instrumento debe colocarse en una superficie horizontal estacionaria.
• A diario, los calibradores PhoenixSpec de 0,25 y 0,5 para el Kit Calibrador PhoenixSpec, o los
calibradores PhoenixSpec de 0,25, 0,5 y 2,0 para el Kit Calibrador PhoenixSpec AP se deben leer
como muestras y las lecturas deben estar entre 0,23 – 0,27 (para el calibrador de 0,25),
0,45 – 0,55 (para el calibrador de 0,5) y 1,8 – 2.2 (para el calibrador de 2,0). Si alguna de estas
lecturas no está dentro de sus rangos correspondientes, recalibre el instrumento PhoenixSpec.
• No es necesario agitar los calibradores PhoenixSpec antes de usarlos.
1. Pulsar el botón de encendido para encender el instrumento.
2. Agite la muestra tapada y deje que las burbujas se dispersen durante 10 segundos.
3. Levantar la tapa e insertar el tubo.
4. Pulsar el botón de Lectura.
5. Leer la pantalla después de que se apague el símbolo de la bombilla.
6. Quitar el tubo de la cámara de lectura.
7. Ajustar la suspensión de muestra con más organismos si la lectura es inferior a la esperada.
Agitar la muestra en vórtex y volver a leer.
Nota: Véase en el Manual del usuario del sistema BD Phoenix la debida preparación de las
muestras para el sistema BD Phoenix si la lectura supera el intervalo de McFarland esperado o
véase el prospecto del sistema BBLCrystal si la lectura supera el intervalo de McFarland esperado.
8. Repetir el paso 7 hasta alcanzar la densidad de McFarland esperada.
9. Una vez terminado el análisis, pulsar el botón de encendido para apagar el instrumento.
RESULTADOS
El instrumento PhoenixSpec presenta las mediciones en unidades de McFarland. Estas unidades
representan la densidad óptica de la suspensión y pueden utilizarse para estimar las UFC/mL de
la suspensión ensayada.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
1. El instrumento PhoenixSpec debe calibrarse con los calibradores PhoenixSpec.
2. Los calibradores PhoenixSpec debe utilizarse únicamente para la calibración del nefelómetro
PhoenixSpec y no como una aproximación manual visual al estándar de sulfato de bario de
McFarland.
3. No utilizar el nefelómetro PhoenixSpec para mediciones fuera del intervalo de 0,1 – 4,5
unidades de McFarland.
4. No se deben medir en el instrumento volúmenes por debajo de 2,0 mL.
5. Hay que utilizar tubos “L” de BD - 16 mm de diámetro x 75 mm - para las muestras.
6. No utilizar el instrumento bajo la luz solar directa.
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO
Para determinar la exactitud del nefelómetro PhoenixSpec, se llevaron a cabo recuentos de
colonias en suspensiones de E. coli ATCC 25922 preparadas en suero salino. Cada dilución de
Intervalo ..........................McFarland 0,10 – 4,50
Exactitud ..........................0,5 ± 0,08 McFarland
2,0 ± 0,1 McFarland
Repetitividad....................0,5 ± 0,04 McFarland
2,0 ± 0,1 McFarland
Tensión de la
red de CA..........................120 VAC ± 10%, 60 Hz
230 VAC ± 10%, 50 Hz
Pilas ..................................Cuatro pilas alcalinas AA
Vida útil de-
las pilas en uso,
nº de pruebas ..................2300 Tests
Condiciones ambiente
de funcionamiento ..........20 °C a 30 °C
0 a 90% HR a 30 °C;
0 a 80% HR a 40 °C;
0 a 70% HR a 50 °C
Intervalo de
temperaturas de
almacenamiento
Nefelómetro: ......................-40 °C a 60 °C
Calibradores: ......................5 °C a 60 °C
Tamaño del tubo
de muestra ......................Tubo ”L” de BD,
16 mm de diámetro,
75 mm de altura
Vida útil de
la bombilla ......................~ 400.000 lecturas
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