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3M Petrifilm - Instruções de Uso

3M Petrifilm
106 pages
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3
(Português)
PT
Descarte
Após serem utilizadas, as Placas 3M Petrilm SEC podem conter microorganismos que podem representar um possível
risco biológico. Siga as normas industriais vigentes para descarte.
Instruções de Uso
Siga todas as instruções com atenção. Caso contrário, pode haver resultados imprecisos.

1. Use diluentes estéreis adequados: água de diluição tamponada de fosfato de Buttereld
5
, água peptonada a 0,1%
5
,
diluente de sal peptonado
6
, água peptonada tamponada
6
, solução de Ringer com um quarto de força
6
, solução de
hidrogenofosfato dipotássico
6
, solução salina (0,85 – 0,90%), caldo Letheen sem bissulto, ou água destilada.
Consulte a seção “󰄈” para obter requisitos especícos.
󰄈󰄈
 Se o tampão de citrato for indicado no procedimento padrão, substitua-o por um dos
tampões listados acima, aquecidos a 40 - 45°C (104 - 113°F).
2. Misture ou homogeneíze a amostra.
3. Para crescimento e recuperação ideal dos micro-organismos, ajuste o pH da suspensão da amostra para car entre
6,5 e 7,5. Para produtos ácidos, ajuste o pH com 1N NaOH. Para produtos alcalinos, ajuste o pH com 1N HCl.

1. Coloque a Placa 3M Petrilm SEC sobre uma superfície nivelada e plana.
2. Levante a película superior e, com a pipeta perpendicular à área de inoculação, despeje 1 mL da suspensão da
amostra no centro da película inferior.
3. Role o lme superior para baixo para a amostra, para evitar o aprisionamento de bolhas de ar.
4. Coloque o Difusor 3M™ Petrilm™ com o lado plano para baixo no centro da Placa 3M Petrilm SEC. Pressione
delicadamente o centro do Difusor 3M Petrilm para distribuir a amostra uniformemente. Espalhe o inóculo sobre
toda a área de crescimento da Placa 3M Petrilm SEC antes que o gel se forme. Não arraste o Difusor 3M Petrilm
sobre o lme.
5. Remova o Difusor 3M Petrilm e deixe a Placa 3M Petrilm SEC imóvel por pelo menos um minuto para permitir a
formação do gel.

Incube as Placas 3M Petrilm SEC em posição horizontal, com a superfície limpa voltada para cima, em pilhas de até 20
placas. Incube as Placas 3M Petrilm SEC durante 24 horas (± 2 horas) a 42°C (± 1°C). Diversos tempos e temperaturas
de incubação podem ser utilizados, dependendo dos métodos de referência locais atuais, alguns dos quais estão
listados na seção intitulada “󰄈”, abaixo.
Interpretação
1. As Placas 3M Petrilm SEC podem ser contadas usando um contador de colônias padrão ou qualquer outro
amplicador iluminado. Não conte as colônias presentes na espuma, pois elas não estão sob a ação dos agentes de
seletividade do meio. Não conte bolhas articiais que possam estar presentes. A E. coli produz colônias de verde-
escuro a verde-claro. As colônias podem ter bolhas de gás associadas a elas. Conte todas as colônias de verde a
azul-esverdeado como E. coli, quer exista ou não a presença de bolhas de gás.
W AVISO
󰄈E. coli
E. coli
E. coli󰄈
2. A área de crescimento circular tem aproximadamente 20 cm
2
. Em Placas 3M Petrilm SEC que contenham mais
de 150 colônias, as contagens podem ser estimadas contando-se o número de colônias em dois ou mais quadrados
representativos e determinando o número médio por quadrado. Multiplique o número médio por 20 para determinar
a contagem estimada por Placa 3M Petrilm SEC.
3. Quando existe presença de colônias em grandes proporções, as Placas 3M Petrilm SEC farão com que toda a
área de crescimento que cinza ou azul, e apresentarão uma ou ambas as seguintes características: muitas colônias
pequenas, indistintas e/ou muitas bolhas de gás. Quando isto ocorre, registre os resultados como incontáveis (INC).
Quando uma contagem real for necessária, plaqueie em uma diluição maior.

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