Tabla 3 Longitud de onda de luz y color (continúa)
Color de la muestra Luz absorbida Longitud de onda (nm)
Rojo-violeta Amarillo-verde 550
Azul Amarillo 580
Verde-azul Naranja 600
Azul-verde Rojo 655
Rango de medición
El rango de medición del instrumento es de 0 a 1,50 Abs
aproximadamente, pero puede usarse hasta un rango de medición de
2,5 Abs si el método químico admite ese rango.
Si las absorbancias de muestra son mayores a 1,50 Abs:
1. Diluya la muestra o utilice cubetas de muestra más pequeñas para
una mejor linealidad y exactitud.
2. Si se utiliza una cubeta de muestra más pequeña como la de 1 cm
(10 ml), finalice la calibración con las cubetas de muestra más
pequeñas.
Nota: La absorbancia aumenta con el aumento del camino óptico de la
cubeta de muestra. Utilice una cubeta de muestra con un camino óptico más
corto para medir las soluciones de color más oscuro.
3. Monitorice la curva de calibración para identificar el rango de
medición de una prueba específica.
El rango de medición es el rango de concentración en el que la
desviación de la linealidad está dentro de los límites aceptables.
Curva de calibración
Las curvas de calibración idealmente deben cortar el punto de
intercepción nulo para la absorbancia. El punto de intercepción nulo es
el punto de concentración cero en el gráfico de calibración. Cuando no
hay analito en la muestra, la absorbancia será cero.
Un punto de intercepción no nulo (una medición de la absorbancia
positiva o negativa a una concentración cero) puede suceder por
varias razones. Los factores que pueden causar un punto de
intercepción no nulo incluyen el blanco de reactivo, el pH, la
temperatura, las especies interferentes o las diferencias de turbidez
entre la solución de ajuste a cero (blanco) y la muestra.
Español 69
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